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名称:急性阑尾炎基因甲基化检测BSP技术服务, 急性阑尾炎DNA甲基化分析MSP检测, 急性阑尾炎表观遗传学甲基化分析亚硫酸盐处理测序

品牌:YELSAB 型号:acute appendicitis

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简介:急性阑尾炎DNA甲基化分析BSP技术
急性阑尾炎基因甲基化分析
急性阑尾炎
BSP
acute appendicitis MSP
acute appendicitis Bisulfite Genomic Sequence
 

甲基化(DNA methylation) DNA 甲基化是最早发现的修饰途径之一,DNA 甲基化能引起染色质结构、DNA 构象、DNA 稳定性及DNA 与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。DNA 的甲基化对、基因印记和肿瘤的发生发展都起重要的作用。在甲基转移酶的催化下,DNA 的CG 两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基,形成5-甲基胞嘧啶,这常见于基因的5'-CG-3'序列。大多数脊椎动物基因组DNA 都有少量的甲基化胞嘧啶,主要集中在基因5'端的非编码区,并成簇存在。甲基化位点可随DNA 的复制而遗传,因为DNA 复制后,甲基化酶可将新合成的未甲基化的位点进行甲基化。DNA 的甲基化可引起基因的失活。这种DNA 修饰方式并没有改变基因序列,但是它调控了基因的表达。一般说来,DNA 的甲基化会抑制基因的表达。

甲基化分析的作用
1、在维持正常细胞功能、维持染色体的结构、X 染色体的失活方面起作用。
2、在遗传印记、胚胎发育过程中起着重要的作用。
3、甲基化状态的改变是引起肿瘤的一个重要因素。故甲基化的研究,为肿瘤的早期预测、分类、分级及预后评估提供了新的依据。
4、启动子CpG 岛的高甲基化是除突变和缺失外肿瘤中抑癌基因失活的第三种机制。基因启动子甲基化检测在临床诊断(如甲基化检测与低剂量CT相结合)、药物敏感性检测等方面具有很高的应用价值。

BSP甲基化是利用重亚硫酸盐使DNA 中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而在适当的实验条件下甲基化的胞嘧啶保持不变(如图所示),再进行PCR 扩增,甲基化的位点可以被当作一个C/T 的SNP来处理;可利用直接测序法来判断是否CpG 位点发生甲基化。

实验流程:
1、提供DNA 样本
2、需检测的基因/CpG 岛信息
3、实验设计与要求
4、DNA 样品质检
5、引物设计、合成
6、重亚硫氢酸盐处理
7、PCR 扩增、测序
8、测序结果分析与整理
9、实验分析报告

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