名称:Senecio vulgaris subsp. vulgaris基因甲基化检测BSP技术服务, Senecio vulgaris subsp. vulgarisDNA甲基化分析MSP检测, Senecio vulgaris subsp. vulgaris表观遗传学甲基化分析亚硫酸盐处理测序
品牌:YELSAB 型号:Senecio vulgaris subsp. vulgaris
产地:PRC 新旧:0
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简介:Senecio vulgaris subsp. vulgarisDNA甲基化分析BSP技术
Senecio vulgaris subsp. vulgaris基因甲基化分析
Senecio vulgaris subsp. vulgaris
BSP
Senecio vulgaris subsp. vulgaris MSP
Senecio vulgaris subsp. vulgaris Bisulfite Genomic Sequence
甲基化(DNA methylation) DNA 甲基化是最早发现的修饰途径之一,DNA 甲基化能引起染色质结构、DNA 构象、DNA 稳定性及DNA 与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。DNA 的甲基化对、基因印记和肿瘤的发生发展都起重要的作用。在甲基转移酶的催化下,DNA 的CG 两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基,形成5-甲基胞嘧啶,这常见于基因的5'-CG-3'序列。大多数脊椎动物基因组DNA 都有少量的甲基化胞嘧啶,主要集中在基因5'端的非编码区,并成簇存在。甲基化位点可随DNA 的复制而遗传,因为DNA 复制后,甲基化酶可将新合成的未甲基化的位点进行甲基化。DNA 的甲基化可引起基因的失活。这种DNA 修饰方式并没有改变基因序列,但是它调控了基因的表达。一般说来,DNA 的甲基化会抑制基因的表达。
甲基化分析的作用
1、在维持正常细胞功能、维持染色体的结构、X 染色体的失活方面起作用。
2、在遗传印记、胚胎发育过程中起着重要的作用。
3、甲基化状态的改变是引起肿瘤的一个重要因素。故甲基化的研究,为肿瘤的早期预测、分类、分级及预后评估提供了新的依据。
4、启动子CpG 岛的高甲基化是除突变和缺失外肿瘤中抑癌基因失活的第三种机制。基因启动子甲基化检测在临床诊断(如甲基化检测与低剂量CT相结合)、药物敏感性检测等方面具有很高的应用价值。
BSP甲基化是利用重亚硫酸盐使DNA 中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而在适当的实验条件下甲基化的胞嘧啶保持不变(如图所示),再进行PCR 扩增,甲基化的位点可以被当作一个C/T 的SNP来处理;可利用直接测序法来判断是否CpG 位点发生甲基化。
实验流程:
1、提供DNA 样本
2、需检测的基因/CpG 岛信息
3、实验设计与要求
4、DNA 样品质检
5、引物设计、合成
6、重亚硫氢酸盐处理
7、PCR 扩增、测序
8、测序结果分析与整理
9、实验分析报告